体视显微镜切片制作方法

上篇文章简单介绍了制作切片的简单方法。工业视频显微镜将传统的显微镜与摄像系统,显示器或者电脑相结合,达到对被测物体的放大观察的目的。金相显微镜电脑型金相显微镜或是数码金相显微镜是将光学显微镜技术、光电转换技术、计算机图像处理技术完美地结合在一起而开发研制成的高科技产品，可以在计算机上很方便地观察金相图像，从而对金相图谱进行分析，评级等以及对图片进行输出、打印。体视显微镜指从不同角度观察物体,使双眼引起立体感觉的双目显微镜。本文详细介绍了专业切片的制作方法。

体视显微镜切片技术制作教学方法：

材料分为分、固、洗、脱水、透明、浸蜡、嵌蜡、切片、胶合、脱蜡、染色、脱水、透明、密封

1 、固定液

( 1 )FAA ：福尔马林一冰醋酸一酒精

90毫升+50%或70%乙醇+5毫升冰醋酸+5毫升福尔马林(37%-40%甲醛)

固定工作时间*短需10h，一般通过不低于24h，可兼做保存液

在年轻材料中使用50%的酒精代替70%的酒精可以防止收缩。 如果材料较硬，稍微减少冰乙酸，稍微增加甲醛，如果材料容易收缩，稍微增加冰乙酸。 加入5ml甘油以防止材料蒸发和硬化。 如果用于植物胚胎材料，使用以下配方以获得**的效果：

50% 乙醇89ML + 乙酸6ML + 福尔马林(37% -40% 甲醛)5mL

( 2 ）卡诺氏固定液：酒精一醋酞一氯仿

配方1: 纯酒精3冰醋酸1(3:1)

配方2：纯酒精6冰醋酸1+氯仿3（或纯酒精30mL+氯仿5mL+冰醋酸10mL），一般材料不超过24h，固定根尖和花药仅需40-60min。 固定后用95%乙醇（85%乙醇）冲洗20min，如不立即处理，转移至70%乙醇中保存。

2.洗涤:FAA固定液不经洗涤直接脱水。

3 、脱水：材料中不同含水，水与石蜡组织不能通过混合，通常由50％、70％、80％、90％、无水就是乙醇，每次1h ，其中一个无水乙醉需2次。材料大的需延长使用脱水处理时间（一般企业此后中国预染色）

透明：常见的透明剂是二甲苯和氯仿。 首先与乙醇和二甲苯(1/2乙醇+1/2二甲苯)混合，然后纯二甲苯(2次)，每次1-2h。

三氯甲烷染色后不能透明。1/5氯仿(4/5无水乙醇)→2/5→3/5→4/5，每品位纯氯仿(2次)3-4小时，在*后纯氯仿中，放入纯石蜡粉多次，盖上瓶盖，36 °C 培养箱36小时，将物料慢慢浸蜡。

5 、浸蜡、包埋：石蜡必须得到纯净、不含任何杂质；浸蜡是使石蜡开始逐渐发展取代透明剂

石蜡：熔点52-56 ℃，一般为50-60 ℃

选择可与乙醇和石蜡混溶的有机溶剂，如二甲苯，温度箱设置为比石蜡在2 ℃ 的熔点高25%→ 50%→ 75%（石蜡、二甲苯溶液）。

待物料透明后，换上新的二甲苯，然后加入等体积的碎蜡，继续加入碎蜡至40℃饱和，然后保持升温3-5h，期间换3次纯蜡，每次约1-2h。